在緩沖液中Tris-HCl與HEPES都是�(yīng)用比較普遍的。為什么把它們兩�(gè)拿出�(lái)�(duì)比,這也是為了很好的讓大家了解到更多相關(guān)信息,以便在采購(gòu)和使用過(guò)程中更準(zhǔn)��
1、Tris-HCl緩沖�
Tris緩沖液是在生物化�(xué)研究中使用較廣泛的一種緩沖劑,其本身為弱�,常用有效pH在“中性”范�,Tris-HCl緩沖液:pH�7.5�8.5;Tris-磷酸鹽緩沖液:pH�5.0�9.0�
1)Tris-HCl緩沖液優(yōu)�(diǎn)
堿性較�(qiáng),可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的范圍pH緩沖�;對(duì)生物化學(xué)�(guò)程干擾很�,不與鈣、鎂離子及重金屬離子�(fā)生沉淀�
2)Tris-HCl緩沖液缺�(diǎn)
pH受濃度影響較大,稀�10�,pH變化大于0.1
溫度效應(yīng)�,如4℃時(shí)pH=8.4�37℃時(shí)pH=7.4
2、HEPES緩沖�
HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH7.2~7.4范圍�(nèi)具有較好的緩沖能�,常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里�
1)HEPES緩沖液優(yōu)�(diǎn)�
在開(kāi)放式培養(yǎng)或Cells觀察時(shí)能維持較恒定的pH�,并�(duì)Cells傷害性作��
2)HEPES緩沖液缺�(diǎn)�
在高濃度�(shí)�(duì)一些Cells可能有毒,與其他緩沖劑相比價(jià)格略��
Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的�(yīng)�
1、Tris-HCl緩沖�
Tris是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體�,穩(wěn)定電泳過(guò)程中的PH。此�,Tris還是制備表面活性劑、硫化促�(jìn)劑和一些藥物的中間�。Tris也被用作滴定�(biāo)�(zhǔn)物。作為蛋白緩沖液�(shí),若后續(xù)工作需要質(zhì)�,則不適宜用Tris,換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液�
2、HEPES緩沖�
HEPES緩沖液對(duì)Cells傷害性作用,它是一種氫離子緩沖�,能較長(zhǎng)�(shí)間控制恒定的pH范圍。使用時(shí)濃度�10-50mmol/L,一般培�(yǎng)液內(nèi)�20mmol/LHEPES即可�(dá)到緩沖能力。它還用于環(huán)�,分析和生物�(xué)研究;作為陽(yáng)離子交換層析中的�(jié)合緩沖液和洗脫液;作為凝膠電泳中的運(yùn)行緩沖液��